公元315年八月，第五猗與杜曾、摯瞻、胡混等人在發動荊州叛亂，因為當時西晉剛剛建國，荊州可謂是東晉王朝的重鎮，且順江而上還會威脅到當時東晉朝廷經濟重鎮（武昌）。於是，晉元帝便命令當時的駐紮武昌（鄂州）轄下邾城附近的周訪出兵平定叛亂。

公元317年11月19日，元帝建武元年九月戊寅廿九，周訪接到出兵的命令後，立馬帶領精兵八千餘人，進駐到了當時武昌（鄂州）轄下的沌陽縣，也就是今天的湖北省武漢市西南沌口經濟開發區沌水北岸附近。

因為剛剛反叛的杜曾等人銳氣甚盛，有些勢不可擋的勁頭。因而，周訪駐紮後便沒有急於出兵攻打他，而他手底下的將領們卻都很不服氣，認為應該立馬出兵滅一滅杜曾等人的囂張氣焰。周訪卻攔住他們解釋道：“這些人剛剛攻佔一些城池，且人數上和氣勢上處於鼎盛期時，此刻就算我們出兵攻打贏了也是損失慘重，先穩一穩消磨一下他們的銳氣，再等機會打他和措手不及。”

於是，便命令將軍李恆督左軍，許朝督右軍，自己則自領中軍坐鎮要害部位，行軍時還高揚旗幟展示自己隊伍數量很多樣子。

果然，杜曾一聽這次來攻打自己的是周訪，心理便起了畏難情緒，但還是先行派兵攻打了並非周訪所親率的左右兩翼。

因為杜曾驍勇聞名，周訪於是於開戰前射殺雉雞以安定兵眾之心，還約定統一的號令，並要求所有一定要遵守：“一旦一翼戰敗就鳴三下戰鼓，兩翼皆敗就鳴六下。”

其中一名叫做趙胤的小將領其代替其父親帶兵守在左翼，經過幾輪腳手，卻是打不過驍勇的杜曾，情急之下便親自騎馬飛奔去向周訪稟告，並請求出兵增援。

周訪見趙胤臨陣退縮，當即勃然大怒，厲聲呵斥其返回戰場繼續戰鬥，不然就以違抗軍令斬首。

趙胤看到周訪不發一兵一卒增援，還以為主帥是不管他們了，於是只好嚎哭大慟返回戰場，儘管戰鬥一直從早上打到半夜，但周訪的左右兩翼部隊還是沒有堅持住敗下陣來了。

周訪聽到戰敗的鼓聲後就選出精兵八百人，親為他們行酒，勒令他們不得輕舉罔動，聞鼓音乃進。賊未至三十步，周訪更親自鳴鼓進攻，將士皆騰躍奔赴，於是直攻杜曾，大敗杜曾部眾並殺了一千多人。周訪隨後乘勝進擊，夜追之，諸將請待明日，訪曰：“曾驍勇能戰，向之敗也，彼勞我逸，是以克之。宜及其衰乘之，可滅。”鼓行而進，於是原本由杜曾控制的漢、沔一帶都被周訪平定，更令杜曾退守武當（今湖北省十堰市丹江口市西北）。周訪在大敗杜曾後獲南中郎將、督梁州諸軍事、梁州刺史，駐屯襄陽（今湖北省襄陽市，鬍子序之敗，梁州陷沒（313年十月“楊虎、楊難敵急攻梁州，鬍子序棄城走，難敵自稱刺史”），故令訪領梁州而屯襄陽）。

周訪謂其僚佐曰：“昔城濮之役（公元前632年），晉文以得臣不死而有憂色，今不斬杜曾，禍難未已。”周訪出其不意，攻打杜曾所據守的武當（今湖北省十堰市丹江口市西北），杜曾不敵逃走。周訪部將蘇溫收杜曾詣軍，並抓獲荊州刺史第五猗、胡混、摯瞻等，送於武昌王敦。又告訴王敦，說第五猗逼於杜曾（猗從杜曾事，始愍帝建興四年（316年），最好不要殺他，王敦不聽，殺了第五猗（元帝太興二年四月甲子廿四，319年6月28日）。

公元319年7月10日，元帝太興二年六月丙子初七，當平定荊州叛亂的捷報傳回晉帝那裡後，皇帝當即將周訪進位安南將軍，持節，都督、刺史如故。