AbMole精研抑制劑十年，最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是：絲氨酸蛋白酶抑制劑肽酶抑制劑進化枝C成員1的敲低抑制NPC細胞的生長。

Serpin 肽酶抑制劑進化枝 C 成員 1 （SERPINC1） 在抗凝和抗炎中發揮作用。本研究的目的是研究SERPINC1在NPC細胞增殖和凋亡中的作用。此外，SERPINC1 基因在 HNE3 細胞系中使用靶向 SERPINC1 的短干擾 RNA （SERPINC1-siRNA） 沉默。透過 Cell Counting Kit-8 測定確定細胞活力；此外，透過流式細胞術研究增殖和凋亡。進行蛋白質印跡和逆轉錄-定量聚合酶鏈反應分析以確定蛋白質和mRNA的表達水平。結果表明，與鄰近健康組織相比，NPC組織中SERPINC1 mRNA和蛋白質的表達水平增加。SERPINC1-siRNA轉染後HNE3細胞中SERPINC1 mRNA和蛋白的表達降低。此外，敲除 SERPINC1 可促進細胞凋亡並抑制增殖。還證明沉默 SERPINC1 上調Bcl-2相關 X 蛋白和 p53 mRNA 和蛋白的表達，並下調 Bcl-2、存活蛋白和細胞週期蛋白 D1 的表達。SERPINC1 的下調降低了磷脂醯肌醇 3-激酶 （PI3K）、蛋白激酶 B （Akt） 和哺乳動物雷帕黴素靶標 （mTOR） 的磷酸化。因此，敲低SERPINC1可能透過抑制PI3K/Akt/mTOR訊號通路促進HNE3細胞凋亡並抑制增殖。

Phosphatase inhibitors（Abmole，M752）在Western blot實驗中用於防止研究中蛋白和脂類的磷酸化狀態丟失，為蛋白磷酸化提供更加全面的保護。

Figure 1。 Expression of SERPINC1 in NPC tissues。

進行RT-qPCR和蛋白質印跡分析NPC和鄰近健康組織中SERPINC1的表達水平。 結果表明，與鄰近組織相比，NPC組織中 SERPINC1 蛋白和 mRNA 的表達水平顯著增加（P

Figure 2。 Effects of SERPINC1 siRNA transfection on the expression of SERPINC1 and the viability of HNE3 cells。

SERPINC1-siRNA 轉染效率透過 RT-qPCR 和蛋白質印跡分析確定。結果表明，與陰性 siRNA 轉染（空載體）對照組相比，SERPINC1 敲低後 HNE3 細胞中 SERPINC1 mRNA 和蛋白質的表達水平顯著降低（P

Figure 4。 Effects of SERPINC1 siRNA transfection on the expression of apoptosis and cell cycle associated genes in HNE3 cells。

為了進一步研究 SERPINC1 敲低對 HNE3 細胞增殖和凋亡的影響，進行了 RT-qPCR 和蛋白質印跡分析以確定凋亡相關（Bax、Bcl-2 和存活蛋白）和細胞週期相關的表達、cyclin D1 和 p53） 基因和蛋白質。結果表明，與空載體組相比，SERPINC1-siRNA轉染細胞中Bax mRNA的表達水平顯著上調，而Bcl-2和survivin mRNA的表達水平下調（P

鳴謝：Jin Xu， et al。 Mol Med Rep。 2019 May；19（5）：3658-3666。