AbMole精研抑制劑十年，最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是：1，25-二羥基-維生素D3透過上調T細胞 Ig-粘蛋白-3表達誘導巨噬細胞極化為 M2。

巨噬細胞極化在受T細胞免疫球蛋白-粘蛋白-3 （Tim-3）調節的免疫調節中起重要作用。本研究的目的是探討 1，25-二羥基維生素 D3 ［1，25（OH）2D3］在巨噬細胞極化中的作用。應用質粒轉染技術製備具有沉默或過表達Tim-3基因的RAW264。7細胞。ELISA用於檢測巨噬細胞分泌的炎症因子水平。透過蛋白質印跡分析確定蛋白質水平。使用逆轉錄定量聚合酶鏈反應評估 mRNA 的表達水平。已確定 1，25（OH）2D3上調 Tim-3 水平並促進白細胞介素 （IL）-10的分泌。還觀察到 1，25（OH）2D3增加轉化生長因子-β 的水平並抑制腫瘤壞死因子-α 和 IL-6。結果還表明，Tim-3 基因沉默誘導巨噬細胞極化為經典啟用的巨噬細胞 （M1），Tim-3 基因的過度表達誘導巨噬細胞極化為替代啟用的巨噬細胞 （M2）。1，25（OH）2D3處理上調巨噬細胞中Tim-3的表達水平，促進細胞向M2極化並抑制向M1極化。本研究的資料表明，Tim-3 可能誘導巨噬細胞向M2極化，1，25（OH）2D3 透過上調 Tim-3 產生免疫抑制作用。

Phosphatase inhibitors（Abmole，M752）在Western blot實驗中用於防止研究中蛋白和脂類的磷酸化狀態丟失，為蛋白磷酸化提供更加全面的保護。

Figure 2。 Effects of 1，25（OH）2D3 on macrophage at 10-8 and 10-7 M concentrations。 RAW264。7 cells were cultured at different 1，25（OH）2D3 concentrations （0， 10-8 and 10-7 M）。

結果表明，Tim-3的表達水平在10-8M和10-7M組中逐漸升高。 然而，雖然 1，25 （OH）2D3 不影響 NOS2 和 COD206 的表達，但它降低了 NOS2 mRNA 水平（P

Figure 3。 Effects of Tim-3 gene silencing on macrophages。

Tim-3基因沉默後，RAW264。7細胞分泌的TNF-α和IL-6水平上調，而IL-10和TGF-β水平下調（P

Figure 4。 Effects of Tim-3 gene overexpression on macrophages。

此外，還檢查了 Tim-3 過表達對細胞因子的影響。確定pTim-3組TNF-α和IL-6水平較NC組降低，IL-10和TGF-β水平較NC升高 組（P

鳴謝：Shuyu Liang， et al。 Mol Med Rep。 2019 May；19（5）：3707-3713。