實驗失敗，大家早就見怪不怪了；

畢竟誰也無法保證每次實驗都能成功；

但要是因此造成珍貴樣品受損或是看著它被直接浪費掉，整個人簡直要心痛至死。

一個極端案例，2012 年美國麥克萊恩醫院，曾因為珍貴的大腦樣本受到損壞而失去研究價值，使得自閉症研究倒退了十年。

雖然我們在日常實驗中不會接觸到如此稀有的樣品，但有很多是我們耗費精力好不容易才得到的，絕不能因為處理不當而被浪費掉。

其實近年來，以冷凍電鏡和 Biacore 分子相互作用為代表的生物分子結構測定和功能研究技術的蓬勃發展，大大降低了對樣品量的要求。實驗中樣品量可以低至微克或毫克級別，體積可以控制到低至微升規模。

不過對於這些微量體積樣品的純化製備，依然面臨著諸多難題。

難題一：如何保證純化解析度

樣品結晶或冷凍電鏡的制樣，要求樣品具有高純度，聚合狀態高度均一，表面電荷高度均一的特點。只有滿足這些條件，才能獲得衍射質量高的晶體和顆粒均一的電鏡投影圖譜。

難題二：如何保證純化回收率

超大蛋白和膜蛋白分子外源表達量極低，原始樣品少，要求層析純化具有很高的回收率，提高純化的效率。

難題三：如何保證靈敏的紫外監測

微量體積的樣品具有較低的紫外吸收值，在純化過程中需要避免稀釋效應造成的紫外訊號減弱，從而導致無法監測到樣品。

Cytiva ÄKTA™pure micro 微量層析系統全新上市,一切皆為微量純化設計。（偷偷告訴你，文末有驚喜～）

無微不至 至純至臻

1、內部體積極小，能有效提高微量體積樣品層析純化的分離度。

系統標配微量體積的閥門、微量體積監測器和極細連線管道，它擁有適用於微量樣品純化的硬體引數和極佳的實驗表現。

表 1。 ÄKTA™pure micro 微量模組內部體積

表 2。 ÄKTA™pure micro 與 ÄKTA™pure 25 M 延遲體積對比

2、與傳統的層析系統相比，可顯著提高實驗的解析度。

在使用 Superdex™200 Increase 3。2/300 微量尺寸排阻預裝層析柱進行實驗時，樣品在 ÄKTA™pure micro 上得到了更好的分離效果（圖 1）。

圖 1。 ÄKTA™pure micro 與 ÄKTA™pure 25 M 實驗層析圖譜對比表

層析柱：Superdex™200 Increase 3。2/300

流速：0。075 ml/min

樣品 （10 μL）：5 mg/mL thyroglobolin （669 kDa）， 0。3 mg/mL ferritin （440 kDa）， 4 mg/mL aldolase （158 kDa）， 3 mg/mL conalbumin （75 kDa）， 4 mg/mL ovalbumin （43 kDa）， 3 mg/mL carbonic anhydrase （29 kDa）， 3 mg/mL ribonuclease （14 kDa）

3、實現精準的微量體積收集。

ÄKTA™pure micro 推薦和雙板組分收集器 F9-T 搭配使用（圖 2）。F9-T 雙板組分收集器能夠放置兩個多孔收集板，使用微量收集多孔板時，可將微孔板放置於微量收集板架上。微量收集滴頭能夠產生微小液體，實現微量體積的分裝收集。滴同步功能（Drop sync）能夠在換管收集時防止樣品液體濺出。

圖 2。 F9-T 雙板組分收集器

適用於 ÄKTA™pure micro 系統的高解析度微量預裝層析柱推薦以下幾款：

1. Superdex™Increase 和Superose™6 Increase系列高解析度分子篩預裝層析柱：

顆粒直徑為 8。6 μM，10/300 GL 的柱型用於 25～ 500 μL 小量樣品的精細製備或鑑定；3。2/300 GL 的柱型用於 4 ～50 μL 微量樣品的精細製備或鑑定；5/150 GL 的柱型用於 4 ～ 50 μL 微量樣品的快速製備或篩選（圖 3）。

圖 3。 Superdex™Increase 與 Superose™Increase 高解析度分子篩預裝層析柱

2. Capto™HiRes 高解析度離子交換預裝層析柱：

顆粒直徑為 9 μM，5/50 的柱型柱體積為 1 mL，載量約為 50 mg。高解析度離子交換柱能夠有效分離純化出表面電荷均一的生物樣品，保證高質量的晶體生長和冷凍電鏡制樣；5/150 GL 的柱型用於 4～ 50 μL 微量樣品的快速製備或篩選（圖 4）。

圖 4。 Capto™HiRes 高解析度離子交換預裝層析柱