作者 | 黃雙旺 梁志剛
單位 | 廣東省第二中醫院檢驗科
前 言
血型是指血液中各種成分的遺傳多型性標誌。血型包括紅細胞血型、白細胞血型、血小板血型等。一般專指紅細胞表面的抗原差異，即紅細胞血型。在臨床試驗中，ABO血型系統是最為重要的血型系統。亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結構和或抗原位點數有一定差異所引起的變化。在臨床工作中ABO亞型屬於“疑難血型”鑑定，是檢驗實驗室檢測能力和水平的重要方式。
下面案例是筆者在實際工作中遇到的一例罕見的ABO亞型。
案例經過
患者，男，34歲，主訴反覆肛周腫物突出半年，加重伴出血1周，擬行環狀痔切+痔結紮術。
手術前相關實驗室檢查結果，如下圖1~4所示
圖1 血常規
圖2 生化
圖3 凝血
圖4 傳染性疾病
手術前ABO血型鑑定，血清學反應格局如下（表1，圖5~8所示）
表1
圖5
圖6
圖7
圖8
ABO血型鑑定出現微柱凝膠法與試管法結果不一致，微柱凝膠法為B型，試管法正定型為“AB”型，反定型為B型，試管法正、反定型不一致。
為排除人為因素或操作失誤，筆者重新對標本進行檢測。檢測結果和前面一樣。
那麼問題來了：
1。 正定型微柱凝膠法與試管法為什麼不一致？
2。 微柱凝膠法正反定型一致的情況下是否依舊存在漏檢的可能？
3。 患者到底是什麼血型呢，AB？、B？、亞型？
帶著這些疑問，筆者對案例作進一步分析
案例分析
一方面，為排除可能人為因素和試劑、儀器的影響；筆者要求臨床重新採集患者標本兩管（1支抗凝管，1支幹燥管）送檢，標本狀態正常、無溶血，脂濁等，血清分離比例正常，鏡下未見紅細胞呈緡錢狀排列；在確保所使用的試劑、儀器均在控狀態後，按照SOP規程操作，分別採用微柱凝膠法和試管法對樣本進行血型鑑定，檢測結果和之前一模一樣，血清反應格局如表1所示，該血型為“凝難血型”鑑定。
另一方面，為了解患者的病史，筆者查閱了其病歷。患者男，34歲，既往體健，無糖尿病和慢性支氣管炎、甲亢等慢性疾病史，無家族遺傳病史，無不良用藥史、無輸血史和手術史，生活較規律，如圖9所示。
圖9
結合實驗室相關檢查結果（圖1~4），可以排除因疾病或藥物原因導致的抗原抗體減弱，基本判斷該案例是ABO亞型。
為確定患者血型，筆者進一步作ABO血型血清學鑑定，血清學反應格局結果如表2所示。
表2
根據ABO亞型的血清學反應特徵鑑定為：B（A）亞型
至此，回到前面提到的問題，便真相大白！
1、正定型微柱凝膠法與試管法鑑定結果為什麼不一致？
主要原因是：一方面因為方法學不同，檢測的敏感度不一樣，另一方面與試劑廠家抗體的來源有關，經與相關廠商技術人員溝通，微柱卡中的抗-A，抗-B是非人源性單克隆抗體，試管法所用的抗-A，抗-B是人源性單克隆抗體，B（A）亞型與人源性單克隆抗體抗-A親和力更強有關。
2、微柱凝膠法正反定型一致的情況下是否依舊存在漏檢的可能？
本案例中微柱凝膠法檢測正反定型一致均為B型，實事上為B（A）亞型，存在漏檢的潛在風險。但根據《臨床輸血技術規範》要求，血型鑑定只要求進行正反定型檢測，沒有要求進行亞型鑑定，所以從法律角度上講不存在漏檢一說。
3、患者到底是什麼血型呢？
透過上述分析，血型血清學檢測，該患者即不是B型，也不是AB型，而是B（A）亞型，一種比較罕見的ABO亞型。
知識拓展
B(A)亞型及血清學特徵
B（A）亞型是一種罕見的ABO亞型，最早由Yamamoto等在1956年發現，其分子機制為B等位基因在正常B基因序列的基礎上發生單鹼基突變，使其具有編碼雙功能活性酶的能力。B（A）亞型在血清學檢測中除表現B抗原特異性外，還表現少量A抗原特異性，從而干擾血型鑑定及配血工作。B（A）型如誤定為AB型，輸入AB型紅細胞可引起溶血性輸血反應。國內已報道7個等位基因。
B（A）亞型的血清學特徵如表3所示
表3
？表示凝集強度存在不確定性。
疑難血型是指一種血型難以檢定或判定的“現象”，本身不是一種獨立血型。
疑難血型的鑑定有時與實驗室條件、水平、經驗有關。
ABO疑難血型：絕大多數因為正反定型不一合而發現，少數因為與以前定型不一致、輸血反應、無效輸血、不合遺傳規律等而發現。
發現ABO正反定型不一致，必須進一步檢查，但不是要強求做到正反定型一致，而是要對ABO正反定型不一致作出科學解釋。
必須指出：只有用手工法，即試管法，才能鑑定疑難血型，微柱凝膠卡，自動化機器，不能鑑定疑難血型。
ABO疑難血型八條提示，避免誤定、漏檢。
1、與以前定型不一致
2、抗-AB，與抗-A，或抗-B凝集強度“不平行”，如：抗-AB凝集4+，抗-A，或抗-B凝集1+
3、正定型，或反定型出現混合凝集（MF）
4、抗-A，或抗-B凝集弱，試劑效價>128，凝集
5、ABO正反定型不合
6、ABO同型配血不合
7、ABO同型輸血，發生溶血性輸血反應，或紅細胞無效輸血
8、ABO血型不符合遺傳規律
總 結
到此，真相水落石出，患者的血型即不是B型，也不是AB型，而是B（A）亞型。B（A）血型是ABO血型中較為罕見的一種亞型，該案例之所以被發現，是筆者科室血型鑑定要求採用兩種不同的方法檢測，如果只用微柱凝膠法，雖然正反定型一致仍然沒能有效檢出，存在漏檢的風險，因此不要過於輕信某一廠家或某一方法學的結果。
有條件的實驗室，建議採用不同廠家、不同方法學進行相應驗證。再者，在臨床工作中，要有高度的責任心，在結果的判讀時要認真、細緻，對有疑問的結果多問個為什麼，尤其是弱凝集的標本，避免漏檢誤檢。
參考文獻
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編輯：徐少卿 審校：陳雪禮