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胎牛血清的正確存放與解凍

幹細胞是一種能夠長期存活,且具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能,幾乎存在於所有組織中的原始細胞。近年來隨著科學家們研究的深入,幹細胞在血液系統疾病、神經系統疾病、心血管疾病、自身免疫系統疾病以及內分泌疾病等各種疾病的治療上讓人們看到了希望。

胎牛血清的正確存放與解凍

胎牛血清的正確存放與解凍是各位實驗家尤為關注的一個問題,經過專業人員從其成分中分析,在保證質量的前提下,胎牛血清的正確存放與解凍的方法,總結如下:

1)儲存血清最好的方法?

我們建議血清應儲存在-5℃至-20℃。然而,若存放於4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。

2)如何解凍血清才不會使產品質量受損?

我們建議您將血清從冷凍箱取出後,先置於2~8℃冰箱使之融解,然後在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。

3)血清解凍後發現有絮狀沉澱物出現,該如何處理?

血清中沉澱物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由於血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍後,也會存在於血清中,亦是造成沉澱物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉澱物,並不影響血清本身的質量。

若您欲去除這些絮狀沉澱物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉澱物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。

4)為什麼要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統。啟用的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟用淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES 細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

5)有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉澱物的形成會顯著的增多,這些沉澱物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受汙染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉澱物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保血清的質量!

6)為什麼儲存在冰箱中的胎牛血清會出現少量沉澱?

胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉澱或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反覆凍融。

7)如何避免沉澱物的產生?

我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:

解凍血清時請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉澱物。解凍血清時請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉澱的發生。

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